SRM3655溶液中的聚糖标准品 (美国NIST)

SRM3655溶液中的聚糖标准品 (美国NIST)主要用作测量酶促释放的 N-连接聚糖的校准标准。 SRM 3655 的潜在应用包括分析技术的基准测试和可比性，作为确保系统适用性和分析方法验证的材料。该材料还可用于对内部校准器或控制材料进行赋值。SRM 3655 由十三 (13) 种通常与单克隆抗体治疗相关的聚糖水溶液组成。每种溶液都含有已知质量分数的纯化的游离还原聚糖。

规格：

一个 SRM 3655 单元由 13 个 0.5 mL 小瓶组成，每个小瓶含有大约 0.2 mL 冷冻溶液。

聚糖的认证值：

表 1 中提供的 13 种聚糖的认证质量分数和估计不确定度基于溶液的重量法制备以及综合纯度分析获得的结果，以及使用液相色谱法确定的分析结果-串联质谱 (LC-MS/MS) 分析。 NIST 认证值是 NIST 最有信心的值，其准确性在于所有已知或可疑的偏差来源都已被调查或考虑在内 [1]。数值以质量分数单位（微克/克）提供，为方便用户，提供物质浓度（微摩尔/升）。使用 22 °C 时的水密度 (0.9977 g/mL ± 0.00083 g/mL) [2] 和平均值，相对每个聚糖的分子量和不确定性 [3]。

来源、准备和分析

来源和制备：用于制备 SRM3655溶液中的聚糖标准品 (美国NIST)的纯化聚糖粉末是在 G.J. 实验室通过化学酶合成方法 [9-13] 生产的。乌得勒支大学（荷兰乌得勒支）和乔治亚大学复杂碳水化合物研究中心（乔治亚州雅典）的恩赐。

聚糖粉末在 NIST 的纯水中通过重量分析法重构，混合均匀，然后分装。 SRM 3655 的单位在 -70 ℃ 以下冷冻保存直至使用。

分析：SRM 3655 价值分配中的所有分析均在 NIST 进行。

通过 LC-MS/MS 分析测量聚糖质量分数：使用 LC-MS/MS 分析实现了 SRM 3655 中聚糖质量分数的定量测量。在三重四极杆质谱仪上使用正极性的多反应监测 (MRM) 分析单独检测聚糖。使用多孔石墨化碳分析色谱柱实现 LC 分离。使用 50 mmol/L NH4HCO2（流动相 A）和 0.1% (v/v) 甲酸的乙腈 (ACN) 溶液（流动相 B）从固定相中洗脱聚糖。测量值校准到聚糖标准品，其纯度和质量分数在 NIST 进行了评估。将市售的棉子糖材料按重量计加标到样品和校准溶液中，并用作 LC-MS/MS 漂移的内部对照。 LC-MS/MS 分析在三到五个独立组中进行，在不同的日子里重复六到七次。每个聚糖的两个片段化转变被归一化为内标信号。对两种色谱分离的异头异构体（α 和 β）进行了标准化。