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SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品)

SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品)

简要描述:SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品)旨在用于人类基因组脱氧核糖核酸 (DNA) 定量材料的价值分配,主要用于定量聚合酶链反应 (qPCR)。

所属分类:美国NIST标准品

更新时间:2022-03-16

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌NIST/美国货号SRM2372a
规格3 vials x 55 µL供货周期现货
应用领域生物产业

SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品) 旨在用于人类基因组脱氧核糖核酸 (DNA) 定量材料的价值分配,主要用于定量聚合酶链反应 (qPCR)。


一个标准物质 NIST SRM 2372a 单元由三种在 pH 8.0 水性缓冲液中充分表征的人类基因组 DNA 材料组成。这些成分来自人类血沉棕黄层样本并标记为 A、B 和 C。成分 A 由来自单个男性供体的基因组 DNA 组成。组分 B 由来自单个女性供体的基因组 DNA 组成。组分 C 由基因组 DNA 的重量混合物组成(1 份男性供体对 3 份女性供体)。一个 SRM 单元由一个装有每种成分的 0.5 mL 无菌小瓶组成,每个小瓶中含有大约 55 µL 的 DNA 溶液。这些小瓶中的每一个都贴有标签,并用颜色编码的螺帽密封。


 认证值在表 1 中提供。这些认证值是根据液滴数字聚合酶链反应 (ddPCR) 对八条染色体上十个*目标的测定计数、稀释因子和液滴体积测量值确定的。 NIST 认证值是 NIST 对所有已知或可疑的偏差来源都已考虑在内的最高置信度的值。


表 1. SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品) 数量和质量浓度的认证值 拷贝数值在计量上可追溯到自然单位计数 1 和比率 1 以及国际单位制 (SI) 导出的体积单位。 DNA 质量浓度值在计量学上可追溯到自然单位计数和比率 1 以及 SI 导出的质量和体积单位。

(a) 值表示为 x ± U95%(x),其中 x 是认证值,U95%(x) 是认证值的扩展不确定度。分析物的真实值被认为位于区间 x 内 ± U95%(x),置信度为 95%。 要传播这种不确定性,请将认证值视为具有平均值 x 和标准偏差 U95%(x)/2 的正态分布随机变量。

(b) 拷贝数浓度值、每纳升人类单倍体基因组当量 (HHGE) 是基于八条染色体上十个*目标的液滴数字 (ddPCR) 分析计数、稀释因子和液滴体积测量值。

(c) 质量浓度值,即每微升人类基因组 DNA 的纳克数,是根据数量浓度结果、参考 HHGE 中核苷酸碱基对 (bp) 的数量以及核苷酸单体钠盐的平均分子量计算得出的 包含 DNA 聚合物。


表 2 列出了 SRM 2372a 组件中线粒体基因组 (mtDNA) 数量相对于核单倍体基因组 (nDNA) 数量的值。 由于它们基于数量有限的独立 ddPCR 检测,因此这些值不符合 NIST 的认证标准,但却是目前可用的最佳估计值。

在需要使用之前,标准参考物质 NIST SRM 2372a 应储存在 2 °C 至 8 °C 之间的黑暗中。在取出样品等分试样进行分析之前,组分小瓶应简单混合并离心(不打开小瓶盖)。为使认证值适用,打开小瓶后应立即取出材料并立即处理。认证值不适用于重新封盖的小瓶中剩余的任何材料。该认证仅适用于初次使用,如果以后使用剩余材料,则不能保证相同的结果。


对于 qPCR 分析,根据认证的质量浓度分配二级标准 DNA 溶液的值。使用由 SRM 2372a 组件制备的一个或多个稀释系列,将检测校准到 SRM 2372a。对于非性别特异性 qPCR 检测,所有三种成分都应用作校准物,以阐明潜在的材料检测特异性相互作用。用户应记住存在移液错误的可能性;因此,在制备校准溶液时应适当小心。


用于制备本产品的每个供体单位都经过 FDA 许可的测试,发现人类免疫缺陷病毒(HIV-1 RNA 和抗 HIV 1/2)、乙型肝炎(HBV DNA 和 HBsAg)呈阴性、丙型肝炎(HCV RNA和抗HCV)、西尼罗河病毒(WNV RNA)和梅毒。此外,根据 FDA 对克氏锥虫(南美锥虫)的指导方针对每个捐赠者进行了测试,发现它们呈阴性/无反应。然而,没有已知的测试方法可以*保证这种材料中不存在传染性病原体。因此,这种基于人类血液的产品应按照生物安全级别 1 进行处理。SRM 2372a 组件和衍生溶液应按照当地、州和联邦法规进行处理。


SRM2372a人DNA定量标准(美国nist标准品) 是在 NIST 进行适当的人类受试者研究确定后开发的。





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