NIBSC93/722白介素10试剂盒的使用方法

　　NIBSC93/722白介素10是由160个氨基酸组成4个α螺旋结构的的细胞因子，分子量为18.5 kDa。在水溶液中以二聚体形式存在，分子量约为39 kDa。是个多效性的因子，能够对多种细胞起作用，主要表现为免疫抑制和免疫刺激两方面的作用，特别是在调节淋巴系和髓系的细胞功能方面扮演重要的作用。IL-10 也具有单核细胞/巨噬细胞依赖、抗原刺激引起的的PBMNC 和 NK 细胞合成其它细胞因子的抑制作用。巨噬细胞膜介导的共刺激引起的T细胞和NK细胞活化后的产物及功能也可被IL-10所抑制。

 

　　IL-10是单核细胞/巨噬细胞功能的强有力的调节物。IL-10作为细胞介导的免疫反应的抑制物，能够抑制像前列腺素E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等许多引起炎症的细胞因子。IL-10 能够促进可溶性TNF受体的释放和ICAM－1和B7在细胞表面的表达。IL-10还参与B细胞、柱状细胞及胸腺细胞的增殖和分化的调控。

 

　　NIBSC93/722白介素10剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-10 的浓度。IL-10 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-10 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-10 抗体后，抗人IL-10 抗体与IL-10 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。

 

　　生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。加入显色剂，若样本中存在IL-10 将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入中止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-10 浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-10 浓度。