NIBSC 20/138标准品SARS-CoV-2 RNA简介

NIBSC 20/138标准品SARS-CoV-2 RNA包含嵌合慢病毒颗粒 (LVP)，其中人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 基因已被武汉一号 SARSCoV-2 分离株的基因取代。在世卫组织国际合作研究中，该制剂与世卫组织 SARS-CoV-2 RNA 国际标准同时进行了评估 (1)。工作试剂的预期用途是作为检测 SARS-CoV-2 RNA 的核酸扩增技术 (NAT) 检测中的二级标准或阳性对照。

NIBSC 20/138标准品SARS-CoV-2 RNA作为建立 WHO SARSCoV-2 RNA 国际标准（NIBSC 目录号 20/146）的合作研究的一部分进行了校准，发现其单位为 6.73 Log10 IU/mL ，当在 0.5mL 分子级水或 PBS 中复溶时，95% 的置信限为 6.58 至 6.88。

每瓶NIBSC 20/138含有 0.5mL 冻干、非传染性、合成 SARS-CoV-2 RNA，包装在 HIV-1 颗粒中。已将单核苷酸突变随机插入到 SARS-CoV-2 RNA 序列中以防止蛋白质表达，并且通过将 SARS-CoV-2 基因组分成四个重叠片段来制备材料。

嵌合 LVP 在通用缓冲液中等摩尔配制，该缓冲液包含 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、0.5% 人血清白蛋白和 1% D-(+)- 海藻糖脱水物，背景为 1x10^5人类基因组 DNA 的拷贝数/mL。包含 SARS-CoV-2 RNA 的四种嵌合 LVP 的完整共有序列保存在 GenBank 登记号 MW059032、MW059033、MW059034、MW059035 下。

NIBSC 20/138标准品SARS-CoV-2 RNA材料应在 0.5 mL 分子级水或 PBS 中复溶。添加后，安瓿应在环境温度下放置 20 分钟，然后混合，避免产生过多的泡沫。重构后，应将 20/138 稀释到适合所用材料/测定的基质中。

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