NIBSC 19/322 流感抗B标准品简介

NIBSC 19/322 流感抗B标准品用于 B/Phuket/3073/2013 样抗原的单次径向扩散测定。使用 B/Phuket/3073/2013 病毒的纯化 HA 在绵羊 743、744、745、746、747 和 748 中制备抗血清试剂。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原并通过在蔗糖梯度上沉降来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

绵羊 743、744、745、746、747 和 748 的免疫计划如下：肌肉内注射一剂约 100 µg 的 B/Phuket/3073/2013 病毒 HA 和弗氏佐剂 (FCA)，随后两周之后使用 20 微克剂量的弗氏不佐剂 (FIA)。每周给予三剂 10 微克的 HA，包括 FIA。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。然后通过 APHIS 批准的灭活 FMDV 方法处理抗血清。将从绵羊 743、744、745、746、747 和 748 获得的抗血清混合，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液按 1:2.8 稀释，并装入 2ml 体积的小瓶中。

NIBSC 19/322 流感抗B标准品对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 15-25 µl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。根据使用的 B/Phuket/3073/2013 抗原标准或根据当地实验室条件，可能需要更改抗血清浓度。

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