转基因玉米Bt11标准物质ERM-BF412dk稳定性测定分析

转基因玉米Bt11标准物质ERM-BF412dk是含有不同质量分数的转基因玉米的五种Bt11玉米粉末认证参考物质(CRMs)之一。转基因玉米Bt11标准物质ERM-BF412dk应用于食品和饲料中转基因Bt11玉米的鉴定和定量方法的校准或质量控制。干的CRM粉具有吸湿性。

转基因玉米Bt11标准物质ERM-BF412dkddPCR方法稳定性测定分析

以10 ng/μL的转基因玉米Bt11标准物质基因 组 DNA 为模板进行 ddPCR，测定转基因玉米 Bt11 品系稳定性。ddPCR 扩增反应的热点图(图 1)显 示，ddPCR所获得的阴性微滴和阳性微滴之间有明 显的荧光信号差距，拖尾现象不严重，通过设置统 一的阈值线可进行阴性和阳性反应点的区分。各 微滴实验结果的数据分析(表3)显示，3次重复扩增 实验微滴数都大于 14 000，满足泊松分布统计(有 效微滴数＞10000)的要求，说明实验数据具有统计 学意义。内参基因 Zein 的 3 次重复实验基因拷贝 数分别为 161、160 和 166，平均拷贝数为 162.33， RSD 为 1.98%；Bt11 品系特异性基因的 3 次扩增反 应所得的拷贝数分别为86.20、81.30和83.90，平均拷贝数为83.80，RSD为2.93%。上述结果表明，本 方法中所用内源和外源基因引物和探针的扩增稳 定性良好，可同时进行转基因玉米Bt11 品系特异 性序列及内源基因的ddPCR检测。

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