CRM-GTX2&3-d 鱼腥藻毒素-2 和-3溶液研制方法说明

CRM-GTX2&3-d 鱼腥藻毒素-2 和-3溶液的研制

从培养的塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)中提取N-硫脲基-2和-3，并化学转化成GTX2和GTX3混合物。纯化后的GTX2&3在真空中干燥，溶于过滤后的0.5mm HCI中，形成原液。用500 MHz质子核磁共振(NMR)、LC-OX-FLD[3](图1)、LC-MS/MS[4](图2和图3)、毛细管电泳-紫外检测(CE-UVD)[5]和液相色谱-化学发光光谱(LC-CLND)[6]对毒素的纯度进行了检测。

CRM-GTX2&3-d 溶液在过滤 (0.2 um) 中制备并在 pH 3.4 下脱气 0.5 mM HCl，然后分配到预先填充有氩气的琥珀色安瓿中，然后立即将其火焰密封。每个安瓿含有大约 0.5 mL 溶液 .

分析方法与价值分配

CRM-GTX2&3-d(表1)的标准值是基于NRC使用两种分析方法得到的结果：1 HNMR(QNMR)，以邻苯二甲酸氢钾(NISTSRM 84I)为校准剂的准确溶液和以咖啡.因(NMIA M724c)为准确溶液的LC-CLND。

CRM-GTX283-d中存在低水平的脱阿米诺酰弓形毒素-2(DcGTX2)、脱羧阿米诺酰弓形毒素-3(DcGTX3)、弓形毒素-1(GTX1)和弓形毒素-4(GTX4)。信息值分配给byic-ox-FLD，并使用NRC CRMS对这些类似物进行校准(表2)。

同质性

代表数量的CRM-GTX2&3-d安瓿是从整个填充系列和GTX2&3浓度测定的LC-OX-FLD。数据用方差分析进行评估。

稳定度

研究表明，储存在+4°C的密封安瓿中的GTX2&3溶液具有良好的长期稳定性，在一年内没有观察到可检测到的分解现象。溶液也是稳定的，当储存在冰箱(-12°℃或更低)。测定结果表明，GTX283在室温下具有良好的稳定性，在不确定度范围内未观察到一个月的分解现象(LC-MS，<1%RSD；n=6)。

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